Al centro del dipinto, la Madonna e il Bambino sono raffigurati su una nuvola, circondati da drappeggi verdi che si aprono come tende. La Vergine, con uno sguardo intenso e malinconico, tiene in braccio il Bambino, che fissa l'osservatore con un'espressione penetrante. Ai lati, San Sisto e Santa Barbara, inginocchiati, rivolgono lo sguardo verso l'alto con devozione, mentre in basso due angioletti poggiano i gomiti con aria pensosa. Questa pittura a olio di Raffaello Sanzio, realizzata tra il 1512 e il 1513, è un esempio sublime dell'Alto Rinascimento e si presta bene a spazi che desiderano un'atmosfera di grazia e solennità.